Métodos de extração, estabilidade e biodisponibilidade da guanitoxina em cultivos de Sphaeropermopsis torques-reginae analisadas por espectrometria de massas / Methods of extraction, stability, and bioavailability of guanitoxin in Sphaeropermopsis torques-reginae cultures analyzed by mass spectrometry

A guanitoxina (GNT) é uma neurotoxina produzida por algumas cepas de cianobactérias dos gêneros Dolichospermum e Sphaerospermopsis>. A GNT é o único organofosforado natural, capaz de causar a morte de animais selvagens e domésticos devido à inibição irreversível da acetilcolinesterase. Apesar de sua alta toxicidade, o diagnóstico da GNT em amostras biológicas ainda é um grande desafio. A dificuldade para sua detecção está diretamente ligada à sua instabilidade em altas temperaturas e pH alcalino, tornando difícil seu monitoramento em corpos d'água. Por isso, esta pesquisa objetivou estudar a estabilidade e biodisponibilidade da GNT em amostras aquosas, com intuito de obter mais informações sobre a natureza química e biológica dessa potente neurotoxina. Para realizar este estudo, a cepa ITEP-24 (S. torques-reginae) produtora de GNT foi cultivada em laboratório sob condições controladas, para obter biomassa para os experimentos de extração, semi-isolamento, estabilidade, ensaio in vitro e identificação por LC-MS/MS. Primeiramente foram realizados testes de extração da GNT partir de células liofilizadas da cepa ITEP-24 utilizando água, metanol e etanol em pH ácido. Depois utilizou-se dois métodos de extração em fase sólida (SPE) com cartuchos preenchidos com fases estacionarias C18 em fase reversa e sílica gel em fase normal, com objetivo de avaliar qual método de SPE seria melhor para extrair e concentrar a GNT. Nós também testamos métodos para lisar as células com sondas de ultrassom, misturador e centrifugação. Além dos métodos de extração, nós avaliamos a estabilidade da toxina em diferentes temperaturas, para isso a biomassa seca contendo a GNT ficou condicionada a 4 °C, 23 °C, -20 °C, -80 °C durantes seis meses, e análises de identificação foram realizadas dentro período de 150 dias em uma sequência de 30 dias. A estabilidade da toxina foi analisada também a partir de extrações em soluções com diferentes valores de pH (1,5; 3,0; 5,0; 7,0; 8,5; 10,5) e temperatura (23 ºC e 37 ºC). Depois, analisou-se a biodisponibilidade da GNT em células frescas da linhagem ITEP-24 através de teste de dissolução in vitro. O objetivo deste teste foi avaliar a liberação da toxina intracelular em meio simulado do conteúdo gástrica e intestinal com e sem enzimas digestivas para compreender e estimar a disponibilidade da GNT in vivo. Os resultados de todos experimentos descritos neste estudo, foram obtidos a partir de análises por cromatografia líquida de interação hidrofílica (HILIC) acoplado ao espectrômetro de massas do tipo triplo quadrupolo LC-QqQ-MS/MS utilizando as transições 253>58, 253>159 e 159>58 [M+H]+ utilizando coluna com fase estacionária zwitteriônica (ZIC). A identificação da GNT foi realizada também por cromatografia líquida acoplada ao espectrômetro de massas de alta resolução (LC-HR-QTOF-MS) com coluna Luna C18, Hydro-RP C18 e ZIC-HILIC. Dos protocolos de extração testados, a combinação de metanol/água (70:30 v/v) com ácido acético (0.3%) extraiu maior quantidade relativa da GNT a partir de células frescas e liofilizadas da cepa ITEP-24 e a concentração da toxina foi maior em amostras de células frescas. Em relação aos métodos de lise celular, as extrações realizadas em sonda de ultrassom com banho-maria e centrifugação por 1h foram estatisticamente significantes para liberar a toxina intracelular. Não houve diferença significativa entre os testes de SPE, no entanto, a semipurificação da toxina foi melhor com cartucho preenchido com sílica gel em fase normal e adaptação desse método em coluna aberta permitiu obter uma fração enriquecida com GNT. A GNT mostrou ser mais estável em pH ácido, sendo o pH 3,0 o melhor para manter e extrair a toxina em amostras aquosas e a toxina intracelular presente em células secas podem degradar em temperatura de 23 °C por um período de 150 dias mesmo em solução com pH 3,0. Durante os testes de extração e purificação foi observado também a degradação da toxina em processos de secagem e ressuspensão. As análises realizadas no LC-HR-QTOF-MS com diferentes métodos cromatográficos possibilitou a identificação da GNT, porém o método realizado com coluna ZIC-HILIC mostrou melhor resolução cromatográfica dos picos relativos m/z e tempo de retenção de toxina. Os resultados obtidos nos testes de dissolução in vitro mostraram que a GNT fica mais disponível no simulado gástrico com e sem a enzima pepsina, mas também pode ser absorvida no intestino. Portanto, o teste de dissolução in vitro pode ser uma ferramenta útil para a avaliação de risco de cianotoxinas in vivo, devido ao seu potencial de monitorar qualitativa e quantitativamente substâncias dissolvidas em fluidos gastrointestinais. Os resultados apresentados neste estudo fornecem informações valiosas para uma melhor compreensão da estabilidade e biodisponibilidade do GNT. Além disso, os métodos apresentados neste estudo podem ser úteis para diversas aplicações projetadas para identificar a toxina em amostras ambientais, bem como orientações para procedimentos de purificação da GNT

Guanitoxin (GNT) is a neurotoxin produced by some strains of cyanobacteria of the genus Dolichospermum and Sphaerospermopsis. GNT is the only natural organophosphate, capable of causing the death of animals from wild and domestic animals due to irreversible inhibition of acetylcholinesterase. Despite its high toxicity, the diagnosis of GNT in biological samples is still a significant challenge. The difficulty in its detection is directly linked to its instability at high temperatures and alkaline pH, making it difficult to monitor in bodies of water. Therefore, this research aimed to study the stability and bioavailability of GNT in aqueous samples to provide more information about the chemical and biological nature of this molecule. The strain ITEP-24 (S. torques-reginae) producing GNT was grown in the laboratory under controlled conditions to obtain biomass for the extraction, semi-isolation, stability, in vitro tests, and toxin identification by LC-MS/MS. Firstly, tests were carried out to extract GNT from lyophilized cells strain ITEP-24 using water, methanol, and ethanol at acidic pH and, two SPE methods in cartridges with stationary phases of C18 reverse phase and normal phase gel silica, to evaluate which would be better to extract and concentrate the GNT. We also tested different methods of cell lysis, such as ultrasound probes, mixers, and centrifugation. In addition to the extraction methods, the stability of the toxin was evaluated at different temperatures, for this, the dry biomass containing the toxin was conditioned at 4 °C, 23 °C, -20 °C, -80 °C for 150 days and analysis of the identification of the GNT was carried out within that period in a sequence of 30 days. The toxin stability was also analyzed from extractions in solutions with different pH values (1.5; 3.0; 5.0; 7.0; 8.5; 10.5) and temperature (23 ºC and 37 ºC). In addition, we performed dissolution tests with fresh cells of the ITEP-24 strain to evaluate the bioavailability of GNT in simulated gastric and intestinal fluids with and without digestive enzymes to understand and estimate the availability of GNT in vivo. The results of all experiments described in this study were obtained from analyzes by hydrophilic interaction liquid chromatography (HILIC) coupled to the LC-QqQ-MS/MS triple quadrupole mass spectrometer using the transitions m/z 253> 58, m/z 253> 159 and m/z 159> 58 [M + H]+ using a column with the zwitterionic stationary phase (ZIC). Liquid chromatography coupled to the high-resolution mass spectrometer (LC-HR-QTOF-MS) with Luna column C18, Hydro-RP C18, and ZIC-HILIC carried out the identification of the GNT. From the extraction protocols tested, the combination of methanol/water (70:30 v/v) with acetic acid (0.3%) extracted a greater relative amount of GNT from fresh and lyophilized ITEP-24 cells, and the concentration of the toxin is higher previously fresh. Concerning cellular methods, the ultrasound probe with a water bath and centrifugation for 1h ware statistically significant to release the intracellular toxin. There was no significant difference between the SPE tests. However, the semi-purification of the toxin was better with a cartridge filled with gel silica in the normal phase and adaptation of this method in an open column allowed to obtain a fraction enriched with GNT. GNT was more stable at acid pH, with pH 3.0 being the best to maintain and the intracellular toxin present in dry cells can degrade at a temperature at 23 °C for 150 days even in pH 3.0 solution. The toxin can also hydrolyze in the drying and resuspension processes. The analyzes carried out in LC-HR-QTOF-MS with different chromatographic methods made it possible to identify the GNT itself, however, the ZIC-HILIC column method showed excellent chromatographic resolution of the relative m/z peaks and toxin retention time. The results obtained in the in vitro dissolution tests showed that GNT is more available in the gastric simulation with and without the enzyme pepsin, but it can also be absorbed in the intestine. Thus, in vitro dissolution tests can be used as a useful tool for the risk assessment of cyanotoxins in vivo due to their potential to qualitatively and quantitatively monitor substances dissolved in gastrointestinal fluids. The results presented in this study provide valuable information for a better understanding of the stability and bioavailability of GNT. Besides, the methods presented in this study can be useful for various applications designed to identify the toxin in environmental samples, as well as guidance on procedures for purifying GNT

Characterization and Biological Performance of Marine Sponge Collagen

Abstract This study characterized the morphological aspects of marine collagen - spongin (SPG) extract from marine sponges, as well as, evaluating its in vitro and in vivo biological performance. Aplysina fulva marine sponge was used for the SPG extraction. It was investigated the physicochemical and morphological properties of SPG by using scanning electron microscopy, Fourier transform infrared spectroscopy, X-ray diffraction and compared to PMMA and bovine collagen. Additionally, the SPG cytotoxicity and its influence on cell proliferation, through in vitro tests. Moreover, the in vivo biological response was investigated using an experimental model of tibial bone defect. The results demonstrated that SPG presented an irregular granular aspect, with a composition of OH, C=O, NH, CN and an amorphous profile. Also, in vitro viability results for the L929 and MC3T3 cell lines cultured with SPG extracts demonstrated normal growth in comparison to controls, except for MC3T3 viability at day 3. For in vivo analysis, using tibial bone defects in rats, SPG treated animals presented an increased rate of material resorption and higher granulation and bone formation deposition in the region of the defect, mainly after 45 days. As a conclusion, SPG was successfully extracted. The in vitro and in vivo studies pointed out that SPG samples produced an increase in L929 and MC3T3 viability and improved the performance in tibial bone defects. It can be concluded that SPG can be used as a bone graft for bone regeneration.

Prevalência e fatores associados ao uso de álcool durante a gestação em uma maternidade de Goiás, Brasil Central / Prevalence and factors associated with alcohol use during pregnancy in a maternity hospital in Goiás, Central Brazil

Resumo O objetivo deste artigo é estimar a prevalência e os fatores associados ao uso de álcool durante a gestação. Estudo de corte transversal em uma amostra de 361 gestantes de um serviço de referência à assistência ginecológica e pré-natal. Os dados relacionados às características sociodemográficas, uso de álcool e potenciais fatores associados foram coletados por meio de entrevista face a face. Análise de regressão de Poisson com variância robusta foi utilizada para verificar os fatores associados ao desfecho analisado. O consumo de álcool na amostra estudada foi de 17,7% (IC 95%: IC 95%: 14,1-22,0%). Antecedentes de diabetes pré-gestacional ou gestacional, ideação suicida e uso de tabaco nos últimos 30 dias foi associado ao uso de álcool durante a gestação (p < 0,05). O estudo apontou alta prevalência de uso de álcool na gestação atual e a sua associação com importantes fatores. Ações como rastreio para o álcool e aconselhamentos sobre os problemas associados ao uso dessa substância principalmente no pré-natal podem contribuir para redução efetiva ou anulação do seu uso em gestantes e agravos materno-fetais relacionados.

Abstract The scope of this article is to estimate the prevalence and factors associated with alcohol use during pregnancy. It involved a cross-sectional study in a sample of 361 pregnant women in a reference service for gynecological and prenatal care. The data related to socio-demographic characteristics, alcohol use and potential associated factors were collected through face-to-face interviews. Poisson regression with robust variance was used to identify factors associated with the outcome analyzed. The consumption of alcohol in the sample was 17.7% (95% CI: 95% CI: 14.1% to 22.0%). A history of pre-gestational or gestational diabetes, suicidal ideation and tobacco use in the last 30 days was associated with alcohol use during pregnancy (p < 0.05). The study showed a high prevalence of alcohol use during the current pregnancy and its association with important factors. Actions such as screening for alcohol and advice on problems associated with the use of this substance, especially during the prenatal period, can contribute to effective reduction of alcohol use in pregnant women and related maternal and fetal injuries.

Software de rastreamento ocular adaptado para reabilitação auditiva de pessoas com múltiplas deficiências no SUS / Eyetracking software adapted for auditory rehabilitation of people with multiple disabilities at the Unified Public Health System

INTRODUÇÃO: O desenvolvimento tecnológico em Audiologia possibilita a criação e aplicação de ferramentas voltadas à reabilitação da pessoa com deficiência auditiva. Todavia, os recentes avanços ainda não abrangem todas as competências necessárias para atender às demandas específicas de pessoas com múltiplas deficiências. OBJETIVO: Avaliar a tecnologia de rastreamento ocular como auxílio à intervenção interdisciplinar para a reabilitação auditiva de pessoas com múltiplas deficiências no Sistema Único de Saúde - SUS. MÉTODO: Trata-se de um estudo de caso, descritivo, exploratório, de natureza qualiquantitativa. Foram realizadas: elaboração de um banco de imagens e construção de um software para o gerenciamento de imagens;aplicação de pilotos para adequação da metodologia; aplicação dos procedimentos desenvolvidos na reabilitação auditiva em seis usuários com múltiplas deficiências. RESULTADOS: O software desenvolvido gerencia 244 imagens validadas,que utilizadas em conjunto com a tecnologia de rastreamento ocular,possibilitou a aplicação da entrevista social e anamnese otorrinolaringológica diretamente aos usuários, assim como, a avaliação audiológica básica,indicação de prótese auditiva, terapia fonoaudiológica e psicológica.As tecnologias propostas foram utilizadas de maneira interdisciplinar, e possibilitaram maior inserção dos usuários em seu processo terapêutico. CONCLUSÃO: Este estudo apontou que é viável a associação do software de imagens à tecnologia assistiva de rastreamento ocular para uso em uma parcela de pessoas com múltiplas deficiências, possibilitando obtenção de respostas e maior participação durante a realização dos procedimentos em saúde auditiva.

INTRODUCTION: The technological development in Audiology allows thecreation and application of tools for rehabilitation of hearing impaired subjects. However, recent advances still do not encompass all skills needed to meet the specific demands of people with multiple disabilities. PURPOSE: To evaluate the eyetracking technology as an aid to the interdisciplinary intervention for the auditory rehabilitation of people with multiple deficiencies in the Unified Public Health System. METHOD: This is a descriptive, exploratory, qualitative-quantitative casestudy. The steps were: elaboration of an image bank and construction ofsoftware for assistive communication using these images; dry-run evaluationsto adapt the methodology; application of the procedures developedin auditory rehabilitation in six users with multiple disabilities. RESULTS: The software developed managed 244 validated images, whichused in conjunction with ocular tracking technology, allowed the applicationof social interview and otorhinolaryngological anamnesis, directlyto the users, as well as the basic audiological evaluation, indication ofhearing aid, speech and psychological therapy. The proposed technologieswere used in an interdisciplinary way, and enabled the insertion ofthese users in their therapeutic process. CONCLUSION: This study showed that it is feasible to associate imaging software with assistive eyetracking technology for people with multipledisabilities. Improving user participation during the performance of auditory health procedures.

Low-level laser therapy associated to a resistance training protocol on bone tissue in diabetic rats

ABSTRACT Objective The present study aimed to evaluate the in vivo response of a resistance training and low-level laser therapy (LLLT) on tibias and femurs of rats with diabetes mellitus (DM). Materials and methods Forty male Wistar rats were randomly distributed into four experimental groups: control group (CG), diabetic group (DG), diabetic trained group (TG) and diabetic trained and laser irradiated group (TLG). DM was induced by streptozotocin (STZ) and after two weeks laser and resistance training started, performed for 24 sessions, during eight weeks. At the end of the experiment, animals were euthanized and tibias and femurs were removed for analysis. Histological, histomorphometrical, immunohistochemistry and mechanical analyses were performed. Results Trained groups, with or without laser irradiation, showed increased cortical area, bone density and biomechanical properties. The immunohistochemical analysis revealed that TG and TLG demonstrated an increased RUNX2 expression. RANK-L immunoexpression was similar for all experimental groups. Conclusion In conclusion, it can be suggested that the resistance exercise program stimulated bone metabolism, culminating in increased cortical tibial area, bone mineral content, bone mineral density and biomechanical properties. Furthermore, the association of physical exercises and LLLT produced higher values for bone mineral content and stiffness. Consequently, these data highlight the potential of physical exercise in the management of bone loss due to DM and the possible extra osteogenic stimulus offered by lasertherapy. Further long-term studies should be carried out to provide additional information.

Effect of low-level laser therapy (808 nm) on skeletal muscle after endurance exercise training in rats

BACKGROUND: Low-level laser therapy (LLLT) has been demonstrated to be effective in optimizing skeletal muscle performance in animal experiments and in clinical trials. However, little is known about the effects of LLLT on muscle recovery after endurance training. OBJECTIVE: This study evaluates the effects of low-level laser therapy (LLLT) applied after an endurance training protocol on biochemical markers and morphology of skeletal muscle in rats. METHOD: Wistar rats were divided into control group (CG), trained group (TG), and trained and laser irradiated group (TLG). The endurance training was performed on a treadmill, 1 h/day, 5 days/wk, for 8 wk at 60% of the maximal speed reached during the maximal effort test (Tmax) and laser irradiation was applied after training. RESULTS: Both trained groups showed significant increase in speed compared to the CG. The TLG demonstrated a significantly reduced lactate level, increased tibialis anterior (TA) fiber cross-section area, and decreased TA fiber density. Myogenin expression was higher in soleus and TA muscles in both trained groups. In addition, LLLT produced myogenin downregulation in the TA muscle of trained animals. CONCLUSION: These results suggest that LLLT could be an effective therapeutic approach for stimulating recovery during an endurance exercise protocol.

Morphological aspects and Cox-2 expression after exposure to 780-nm laser therapy in injured skeletal muscle: an in vivo study

Background: The effectiveness of low-level laser therapy in muscle regeneration is still not well known. Objective: To investigate the effects of laser irradiation during muscle healing. Method: For this purpose, 63 rats were distributed to 3 groups: non-irradiated control group (CG); group irradiated at 10 J/cm² (G10); and group irradiated at 50 J/cm² (G50). Each group was divided into 3 different subgroups (n=7), and on days 7, 14 and 21 post-injury the rats were sacrificed. Results: Seven days post-surgery, the CG showed destroyed zones and extensive myofibrillar degeneration. For both treated groups, the necrosis area was smaller compared to the CG. On day 14 post-injury, treated groups demonstrated better tissue organization, with newly formed muscle fibers compared to the CG. On the 21st day, the irradiated groups showed similar patterns of tissue repair, with improved muscle structure at the site of the injury, resembling uninjured muscle tissue organization. Regarding collagen deposition, the G10 showed an increase in collagen synthesis. In the last period evaluated, both treated groups showed statistically higher values in comparison with the CG. Furthermore, laser irradiation at 10 J/cm2 produced a down-regulation of cyclooxygenase 2 (Cox-2) immunoexpression on day 7 post-injury. Moreover, Cox-2 immunoexpression was decreased in both treated groups on day 14. Conclusions: Laser therapy at both fluencies stimulated muscle repair through the formation of new muscle fiber, increase in collagen synthesis, and down-regulation of Cox-2 expression. .

Effects of low-intensity pulsed ultrasound on injured skeletal muscle

BACKGROUND: Low-intensity pulsed ultrasound (LIPUS) has been shown to stimulate tissue metabolism and accelerate muscle healing. However, the optimal parameters in the use of LIPUS are still not clear. OBJECTIVE: The aim of this study was to analyze the effects of LIPUS on muscle healing in rats subjected to a cryolesion. METHOD: Twenty rats were divided into the following groups: an injured control group (CG) and an injured treated group (TG). Both groups were divided into 2 sub-groups (n=5 each) that were sacrificed 7 and 13 days post-surgery. Treatments were started 24 hours after the surgical procedure and consisted of 3 or 6 sessions. After euthanasia, the muscles were submitted to standard histological procedures. RESULTS: Qualitative analyses were based on morphological assessments of the muscle. The histopathological analysis on day 7 revealed that the muscles in the CG and the TG presented an intense inflammatory infiltrate, a large necrotic area and a disorganized tissue structure. After 13 days, both the CG and the TG had granulation tissue and newly formed fibers. The TG presented a more organized tissue structure. The quantitative analysis of collagen indicated similar findings among the groups, although the qualitative analysis revealed a better organization of collagen fibers in the TG at 13 days. The immunohistochemical analysis indicated that, at both time points, the expression of cyclooxygenase-2 was upregulated in the TG compared to the CG. CONCLUSIONS: LIPUS used as a treatment for muscle injury induced a more organized tissue structure at the site of the injury and stimulated the expression of COX-2 and the formation of new muscle fibers. .

Avaliação da distribuição de cobre associado a compostos de diferentes massas moleculares na polpa de açaí / Evaluation of the distribution of copper associated to compounds of different molecular weights in the acai pulp

Neste estudo, cromatografia de exclusão por tamanho (SEC) com detecção por UV e detecção off-line por espectrometria de absorção atômica em forno de grafite (GF AAS) foi usada para investigar a associação de cobre a espécies de alta massa molecular (HMW) e baixa massa molecular (LMW) presentes na polpa de açaí (Euterpe oleracea Mart.). A concentração total de cobre obtida nos digeridos da polpa de açaí foi 10,5 µg g-1. Cobre foi encontrado associado às frações de HMW e LMW, correspondentes às massas moleculares de 28,7, 2,6 e 0,43 kDa.

In this study, size exclusion chromatography (SEC) with ultraviolet (UV) and graphite furnace atomic absorption spectrometry (GF AAS) off-line detection was used to investigate the association of copper to high molecular weight (HMW) and low molecular weight (LMW) species present in Euterpe oleracea Mart. pulp. Total concentration of copper was 10.5 µg g-1. Copper was found to be associated to fractions corresponding to 28.7, 2.6 and 0.43 kDa.

Comparação dos efeitos do laser de baixa potência e do ultrassom de baixa intensidade associado ao Biosilicato® no processo de reparo ósseo em tíbias de ratos / Comparative study of the effects of low-level laser and low-intensity ultrasound associated with Biosilicate® on the process of bone repair in the rat tibia

OBJETIVO: Verificar os efeitos da associação do Biosilicato® com o US e com o LLLT no processo de consolidação óssea em ratos, a partir da análise biomecânica e histológica. MÉTODOS: Foram utilizados 40 ratos machos distribuídos em quatro grupos (n = 10): grupo controle fratura sem tratamento (GCF); grupo tratado com Biosilicato® (GB); grupo tratado com Biosilicato® + laser (GBL); grupo tratado com Biosilicato® + US (GBUS). RESULTADOS: A análise biomecânica não apresentou diferença estatisticamente significativa nos grupos após o período experimental de 14 dias. Na análise morfométrica, o grupo controle apresentou presença moderada de tecido ósseo neoformado no interior dos defeitos e o grupo tratado com Biosilicato® apresentou resultados semelhantes. No entanto, foi observado o potencial osteogênico do biomaterial, uma vez que houve grande presença de células e tecido ósseo ao redor das partículas. Interessantemente, os grupos Biosilicato® associado ao laser terapêutico e ao US demonstraram quantidades menores de deposição de tecido ósseo quando comparados aos grupos controle fratura e Biosilicato®. CONCLUSÃO: A partir dos dados deste estudo podemos concluir que o Biosilicato® foi capaz de acelerar e potencializar a recuperação óssea, através da modulação do processo inflamatório e da estimulação da formação de tecido ósseo novo. No entanto, quando a LLLT ou o US foram associados, não foram encontrados resultados positivos.

OBJECTIVE: Verify the effects of the association between Biosilicate® and ultrasound and, Biosilicate® and laser in bone consolidation process of rats, through the biomechanical and histological analysis. METHODS: Forthy male rats were used. The animals were randomized into four groups (n=10): control group fracture no treated (CGF); group treated with Biosilicate® (BG); group treated with Biosilicate® and laser (BLG); group treated with Biosilicate® and ultrasound (BUG). RESULTS: The biomechanical analysis showed no significant difference among any groups after 14 days post-surgery. In the morphometric analysis, the control group showed moderate presence of new formed bone tissue inside the defects areas and the Biosilicate® group showed similar results. Despite those facts, the biomaterial osteogenic potential was demonstrated by the great amount of cells and bone tissue around the particles. Curiously, the Biosilicate® plus laser or ultrasound groups showed lower amounts of bone tissue deposition when compared with control fracture and Biosilicate® groups. CONCLUSION: The data from this study can conclude that Biosilicate® was able to accelerate and optimized the bone consolidation, through the modulation of the inflammatory process and the stimulation of new bone formation. However, when resources were associated, there are no positive results.

Comparação dos efeitos do laser de baixa potência e do ultrassom de baixa intensidade no processo de reparo ósseo em tíbia de rato / Comparison of the effects of low-level laser therapy and low-intensity pulsed ultrasound on the process of bone repair in the rat tibia

CONTEXTUALIZAÇÃO: Recursos eletrofísicos, como o ultrassom (US) e a terapia laser de baixa potência (LLLT), vêm sendo cada vez mais utilizados na prática fisioterapêutica. Estudos sugerem que esses recursos são capazes de estimular a proliferação de osteoblastos e a osteogênese no local da fratura, promovendo maior deposição de massa óssea e acelerando o processo de consolidação. OBJETIVO: Analisar os efeitos do US e da LLLT no processo de consolidação óssea por meio das análises biomecânica e histológica do calo ósseo. MÉTODOS: Foram utilizados 30 ratos machos, distribuídos aleatoriamente em três grupos: grupo controle fratura, sem tratamento (GC); grupo fratura tratado com US pulsado com burst de 1,5 MHz, 200us, 1KHz, 30 mW/cm² (GUS) e grupo fratura tratado com laser 830nm, 100mW, 120J/cm² (GL). Foram realizados defeitos ósseos circulares com broca de 2 mm de diâmetro nas tíbias dos animais. Os tratamentos foram realizados a cada 48 horas, totalizando sete aplicações e, no 14º dia, os animais foram sacrificados. A tíbia direita foi designada para análise biomecânica, enquanto a esquerda, para análise histológica. RESULTADOS: A análise biomecânica não mostrou diferença estatisticamente significativa entre as propriedades biomecânicas do GC, GL e GUS. Na análise morfométrica, tanto GUS quanto GL apresentaram área de osso neoformado estatisticamente maior em relação ao GC. No entanto, quando as duas modalidades de tratamento foram comparadas, não foram encontradas diferenças estatísticas entre elas. CONCLUSÃO: Ambos os recursos utilizados neste estudo foram capazes de acelerar o processo de reparo ósseo em ratos.

BACKGROUND: Electrophysical agents such as Ultrasound (US) and low-level laser therapy (LLLT) have been increasingly used in physical therapy practice. Studies suggest that these devices are able to stimulate osteoblast proliferation and osteogenesis at the fracture site, resulting in a greater deposition of bone mass and speeding up the consolidation process. OBJECTIVE: The aim of this study was to analyze the effects of US and LLLT on the bone healing process, through biomechanical and histological analysis of the bone callus. METHODS: A total of 30 rats were randomly allocated into three groups: control group fracture without treatment (GC); fracture group treated with pulsed US, burst 1.5 MHz, 200us, 1KHz, 30 mW/cm² (GUS) and fracture group treated with laser 830nm, 100mW, 120J/cm² (GL). Bone defects were performed with a circular drill of 2mm in diameter in the animal's tibias. The treatments were carried out after surgery consisting of 7 applications every 48 hours. After 14 days the animals were sacrificed and the tibias were removed to perform the analysis, being the right tibia designated for biomechanical analysis, while the left tibia for histological analysis. RESULTS: The biomechanical analysis showed no statistically significant difference between biomechanical properties of the CG, CL and GUS. In morphometric analysis, both GUS and GL showed a significantly higher woven bone tissue area compared to the control group. However, when the two treatment modalities were compared, there were no statistical differences between them. CONCLUSION: Both devices used in this study were able to accelerate the bone healing process in rats.

Efeitos dos recursos eletrofísicos na osteoporose: uma revisão da literatura / Effects of electrophysical resources in osteoporosis: a review of the literature

OBJETIVO: Fazer uma revisão bibliográfica a respeito dos efeitos dos principais recursos eletrofísicos utilizados na aceleração do metabolismo ósseo e no tratamento da osteoporose. ANTECEDENTES: A Organização Mundial da Saúde (OMS) define a osteoporose como doença esquelética sistêmica caracterizada por diminuição da massa óssea e deterioração microarquitetural do tecido ósseo, com consequente aumento da fragilidade óssea e susceptibilidade à fratura. Vários tratamentos medicamentosos e não medicamentosos vêm sendo desenvolvidos na tentativa de aumentar a massa óssea e prevenir a osteoporose. Dentro desse contexto, os recursos eletrofísicos vêm tendo um papel de destaque, como recursos que apresentam um potencial osteogênico, capazes de estimular a proliferação de osteoblastos e biomodular o metabolismo ósseo. ESTRATÉGIA DE PESQUISA: Foram consultadas as bases de dados: The Cochrane Library, MEDLINE, Embase, LILACS, SciELO, referências dos artigos identificados, e contato com especialisas em laser, entre os anos de 1983 e 2009. CRITÉRIOS DE SELEÇÃO: Foram incluídos estudos experimentais e ensaios clínicos randomizados que avaliaram os efeitos dos recursos eletrofísicos na osteoporose. RECOMPILAÇÃO E ANÁLISE DE DADOS: Dois revisores selecionaram independentemente os estudos, avaliaram sua qualidade metodológica dos estudos e coletaram os dados. RESULTADOS: Todos os recursos eletrofísicos citados neste artigo se mostraram eficazes na estimulação do metabolismo ósseo. No entanto, a grande maioria dos estudos realizados evidenciam esses efeitos através de estudos in vitro e estudos experimentais com cobaias. Cabe ressaltar que trabalhos como esses são raros em seres humanos. Baseado nos achados desta revisão pode ser sugerido que os recursos eletrofísicios como o laser terapêutico, o ultrassom, campos eletromagnéticos e plataformas vibratórias são recursos que tem um potencial osteogênico entretanto mais estudos são necessários para definir os efeitos dos mesmos em humanos, bem como, protocolos mais eficazes de tratamento. CONCLUSÃO: A partir deste levantamento bibliográfico, fica evidente que os recursos eletrofísicos apresentam um grande potencial osteogênico, porém, a maior parte dos estudos é in vitro. São necessários mais estudos in vivo, definindo, assim, melhores parâmetros e doses, para que sejam utilizados no tratamento da osteoporose.

OBJECTIVE: The aim of this article was to provide a literature review regarding the impact of the main eletrophysical resources used on the acceleration of bone metabolism and on the osteoporosis treatment. DEFINITION: The OMS defines osteoporosis as a Sistemic esqueletical disease characterized for diminished bone mass and for deterioration of the bone mass microarchitecture, increasing the bone fragility and susceptibility to fracture. Many drug or non-drug treatments are being developed as an attempt to increase the bone mass, and prevent osteoporosis. Within this context, the eletrophysical resources is having a prominence paper, as a resource which presents a osteogenic potencial, capable of stimulating the proliferation of osteoblasts and biomodulate the bone metabolism. RESEARCH STRATEGIES: The data base consulted were: The Cochrane Library, MEDLINE, Embase, LILACS, SciELO, references of indentified articles and contact with laser's especialists, between 1983 and 2009. SELECTION CRITERIA: Were included experimental study and randomized clinical tests on the effects of eletrophysical resources on osteoporosis. RECOMPILATION AND DATA ANALISIS: Two reviewers independently selected the studies, assessed their methodological quality and collected the data. RESULTS: All the eletrophysical resources quoted on this article were effective in stimulation of bone metabolism. However, most of the studies show these effects through in vitro studies and experimental studies with animals. It is important to say that experiments like these are rare in human beings. Based on the findings of this review, it may be suggested that the eletrophysical resources like lasertherapy, ultra-sound, electromagnetic fields and vibration are resources that has osteogenic potencial, but more studies are needed to define the effects of it in humans, as well as more effective treatment protocols. CONCLUSION: With this literature review it is clear that eletrophysical resources have high osteogenic potential, but most of the studies are in vitro. It is needed more studies in vivo, defining therefore, better parameters and doses to be used in the treatment of osteoporosis.

Mascaramento clínico: aplicabilidade dos métodos platô e otimizado na pesquisa dos limiares auditivos / Clinical masking: applicability of plateau and optimized methods in hearing thresholds testing

BACKGROUND: many situations may raise difficulties when obtaining hearing thresholds for each ear separately. These situations demand the use of masking. The plateau method has been used for more than four decades. Nevertheless, in 2004 a different masking protocol was suggested, called the optimized method, to replace the plateau method in specific cases. AIM: to evaluate the feasibility of two clinical masking methods, plateau and optimized, in the testing of hearing thresholds. METHOD: participants of this study were 40 individuals aged 15 to 65 years, with either unilateral or bilateral hearing losses. All participants underwent air and bone conduction pure tone audiometry for both ears, with and without the use of the two masking methods, considering unilateral, bilateral, symmetrical and bone-only patterns. RESULTS: there was no statistically significant difference between the two masking methods for obtaining the air conduction hearing thresholds considering the tested situations. However, there was a higher percentage difference for the symmetrical pattern in the air conduction retest situation. There was a statistically significant difference between the plateau and optimized methods regarding the bone conduction thresholds for the symmetrical and bone-only patterns. CONCLUSION: the plateau method can be used for all patterns and the optimized method is the most effective for unilateral and bilateral patterns. Therefore, it is important for the audiologist to have the knowledge about the application of both masking methods in order to obtain more reliable results.

TEMA: na audiometria tonal liminar (ATL) algumas situações dificultam a obtenção dos limiares auditivos para cada orelha separadamente, havendo a necessidade do mascaramento. O método Platô, é o mais utilizado há mais de quatro décadas. Em 2004, foi sugerido um protocolo de mascaramento em que o método Otimizado substituiria o Platô, em casos específicos. OBJETIVO: analisar a aplicabilidade dos métodos Platô e Otimizado, na pesquisa dos limiares auditivos. MÉTODO: participaram deste estudo 40 indivíduos, de 15 a 65 anos, com perda auditiva unilateral ou bilateral. Foi realizada a ATL por via aérea (VA) e via óssea (VO), para ambas as orelhas, sem e com a utilização do mascaramento, segundo os padrões unilateral, bilateral, simétrico e somente-ósseo. RESULTADOS: não houve diferença estatisticamente significante entre os dois métodos para a obtenção dos limiares por VA, para os padrões avaliados. Contudo, houve um maior percentual de diferença para o padrão simétrico, durante reteste de VA. Houve diferença estatisticamente significante entre os métodos Platô e Otimizado, para a obtenção dos limiares por VO, para os padrões: simétrico e somente-ósseo. CONCLUSÃO: o Método Platô pode ser utilizado para todos os padrões e o Otimizado é mais eficaz para os padrões unilateral e bilateral. Desta forma, é necessário que o audiologista saiba diferenciar os melhores casos para a aplicação de um dos dois métodos e assim, obter resultados fidedignos.

Utilização de abridor de boca de baixo custo na higiene bucal de crianças portadoras de paralisia cerebral / Use of a low cost mouth prop in oral hygiene of children with cerebral palsy

Os pacientes portadores de paralisia cerebral muitas vezes apresentam rigidez da musculatura facial, o que dificulta a higienização bucal, favorecendo o aparecimento da doença cárie e da doença periodontal. O objetivo do trabalho foi avaliar o uso pelos responsáveis pela higiene bucal em crianças portadoras de paralisia cerebral na dentição decídua, do abridor de boca de baixo custo (confeccionado com mangueira de jardinagem). Métodos - Após a aprovação da Comissão de Ética da Universidade Cidade de São Paulo - UNICID, foram avaliadas 61 crianças portadoras de paralisia cerebral, entre 3 e 6 anos de idade, de ambos os sexos, atendidas em Clínicas de Fisioterapia da UNICID no ano de 2002, apresentando dentição decídua completa. Examinador foi calibrado e participou de todas as etapas do estudo. Foi utilizado o índice de placa em três etapas: (1) antes da escovação (índice inicial), (2) após a escovação, sem o abridor de boca, (3) após a escovação com o abridor de boca. Foram obtidas as informações sobre diagnóstico da paralisia cerebral, quem realiza a higiene bucal da criança e facilidade do uso do abridor de boca de baixo custo pelo responsável. Resultados - Foi observada uma diferença estatisticamente significante entre as três etapas (p < 0,000). Os índices médios de placa nas três etapas foram: (1) inicial = 1,89; (2) após escovação sem o uso de abridor = 1,40 e (3) após escovação, com o uso do abridor = 0,90. Conclusão - Deste modo foi observada uma diminuição significativa no índice de placa das crianças portadoras de paralisia cerebral com o uso do abridor de boca